Efecto del acido eicosapentaenoico sobre el mecanismo de producción de prostaciclina I2 endotelial inducida por el contacto directo con linfocitos

Ensayo Clínico

Tesis de grado (Doctor en Ciencias Fisiológicas) -- Universidad Central de Venezuela. Facultad de Medicina. Coordinación de Estudios de Postgrado, jul. 2015.

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Objetivos: Definir el subtipo linfocitario implicado en la síntesis de prostaciclina Iý (PGIý) endotelial inducida por el contacto directo con linfocitos; evaluar el efecto del enriquecimiento celular en ácido eicosapentaenoico (EPA), sobre la familia Src tirosina quinasas, las MAPK ERK1/2 y la COX-1 endotelial; y evaluar la participación de la COX-2, en el aumento de la producción del autacoide. Métodos: Las células endoteliales se aislaron de la vena umbilical humana (HUVEC). Los linfocitos se obtuvieron de sangre total humana. Las células se co-incubaron en un medio libre de suero a 37 øC, en condición estática por 4 horas. Para estudiar el efecto del EPA sobre este mecanismo, las células se enriquecieron previamente en EPA por 24 horas. La PGIý se determinó en el sobrenadante del MEDIO DE CO-INCUBACIÓN, bajo la forma de 6-ceto-PGF1a. Las Src y ERK1/2 (fosforiladas y totales), se detectaron por inmunoimpresión. La expresión de COX-1 y COX-2 se determinó por RT-PCR. Resultados: Los LT-CD4+ y LT-CD8+ aumentaron la síntesis de PGI2 basal. El EPA reguló negativamente la fosforilación de ERK1/2, solo en la condición inducida; mientras las fosfo-Src, fueron reguladas en ambas condiciones, basal e inducida. La expresión de COX-2 aumentó significativamente durante la co-incubación HUVEC-PBL. En todas las condiciones estudiadas, se detectó la expresión de mensajeros para la COX-1. Conclusiones: Se confirma que la interacción HUVEC-PBL recluta y activa la vía de señalización: Src/ ERK1/2/ PLA2/ COX/ PGIS, aumentando la producción de PGI2 endotelial. De forma original demostramos que esta vía es inducida por el contacto HUVEC-LT, es mediada por COX-2 y modulada por el EPA(AU)

Aprobado