Caracterización de antígenos solubles de Plasmodium falciparum : posible aplicación en el diagnóstico

Tesis de grado (Doctor en Ciencias Fisiológicas mención Bioquímica) -- Universidad Central de Venezuela. Facultad de Medicina. Comisión de Estudios de Postgrado, jul. 1993.

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Se describe la identificación de productos de excreciónde Plasmodium falciparum, en sangre de pacientes infectados y en sobrenadantes de cultivos. Se seleccionaron dos enfoques: a) dirigido a la captura de los posibles antígenos presentes en el plasma de pacientes con cuadro agudo de malaria por Plasmodium falciparum mediante el uso de anticuerpos antimalaria provenientes de pacientes hiperinmunes, b)capturar un componente parasitario muy específico la Glutámico Deshidrogenasa (NADP+)- de Plasmodium falciparum, con un policlonal anti-GDH(NADP+) de Proteus spp producido en conejo, tomando ventaja de las relaciones inmunológicas de esta enzima en ambas especies. El análisis por "Western blot" de esta fracción, indica la presencia de 2 bandas de Mr. 33 y 35 KDa. respectivamente reconocidas por los policlonales antiparásito total, antisobrenadante de cultivo, suero hiperinmunes (Yanomami) y el conjugador IgG-antimalaria-Peroxidasa. El uso del inmunoadsorbente Sepharosa-Ig-anti-GDH(NADP+) de Proteus spp, permitió la Fracción II, a partir de plasmas de pacientes que cursan con cuadro agudo de malaria por Plasmodium falciparum. El análisis por "Western blot", de esta fracción indica el reconocimiento de banda de Mr. 60 KDa. por los policlonales antisobrenadante de cultivo, antiparásito toal, suero hiperinmune (Yanomami) y el conjugado anti-GDH(NADP+)-Peroxidasa. La presencia de anticuerpos tipo IgG en el plasma de pacientes maláricos primoinfectados y que habían sufrido 2 ó más malarias por Plasmodium falciparum, se evaluó mediante Elisa usando dos modalidades de ensayo: directo y por inmunoadsorción del antígeno. Para la fracción I, el nivel de anticuerpos tipo IgG detectado en el grupo de pacientes primoinfectados resultó mayor que el del grupo que había sufrido 2 ó mas malarias, mientras que para la Fracción II, no se observaron diferencias significativas entre ambos grupos de pacientes...(AU)